http://muchong.com/t-6701677-1 Splet软件给出的Tm值相当高。 相对于以下的结果图 第一对引物 Tm 第二对引物 Tm 第三对引物 Tm 第四对引物 Tm 摸条件四次结果，都非常不好，（也用过热启动，什么都没P出来，只 …

所谓引物的Tm值，到底有多少意义 - 百度知道

Splet07. dec. 2016 · 在一定条件下tm高低由dna分子中的g-c含量所决定。g-c含量高时，tm值比较高，反之则低。这是因为g-c之间的氢键较a-t多，解链时需要较多的能量之故。tm值 … SpletGCリッチなターゲットの場合、Tm値が60℃を超えるプライマーを推奨します。 異なるプライマー対を用いた複数の増幅反応を同一条件で行いたい場合は、使用酵素、PCR条件に合わせてTm値が適切になるよう各プライマーを設計することをお勧めします。 mohammad yousef mteir

qPCR 常见问题及解决方法 - Promega

Splet1.退火温度高于引物 Tm 值。 2.预变性时间太短。 3.反应程序各阶段时间过长。 D.试剂未充分混匀或移液误差. 反应体系中， PCR 反应成分的局部浓度过高或不均匀，导致 PCR 扩增不呈指数扩增。 E.扩增子长度. 扩增子长 … Splet如果扩增效率比较高，Ct值降低是自然而然的事情； 如果遇到扩增效率大于1，要注意检查引物，它会不会产生二聚体，它的特异性如何，是不是要重新设计，因为扩增效率是根本； 扩增效率不高的主要原因有：热启动Taq酶活性不足、dNTP不纯、没有调校好Buffer、以及模板不纯，存在PCR扩增抑制，建议更换试剂盒。 我是Nothing，欢迎参与讨论。 发布于 … SpletHow to use the T m calculator. The calculator calculates recommended T m (melting temperature) of primers and PCR annealing temperature based on the primer pair sequence, primer concentration, and DNA polymerase used in PCR. The calculator also calculates the primer length, percentage of GC content, molecular weight, and extinction coefficient. mohammad yousuf snooker video